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Dettagli
Figura 1
Figura 2
Figura 3
Figura 4

 

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La reazione a catena della polimerasi (PCR)

La PCR (Polymerase Chain Reaction) permette l'amplificazione in vitro di campioni estremamente diluiti di DNA, senza preliminare trasferimento in cellule viventi. Mediante sintesi chimica vengono prodotti oligonucleotidi di innesco (primers) complementari a sequenze note, adiacenti alla regione di DNA da amplificare. Attraverso una serie di cicli (~30) di temperatura il DNA a doppio filamento viene denaturato, fatto ibridare con i primers e duplicato mediante la Taq DNA polimerasi che ha la particolarità di resistere alle alte temperature.

Durante la reazione la quantità di DNA duplex cresce in modo esponenziale. In Teoricamente, dopo 32 cicli, saranno presenti circa un miliardo di copie di molecole di DNA (2(n-1) dove n è il numero dei cicli).

Esempi di applicazione della PCR ed alcune letture consigliate sono riportati nella pagina Dettagli.